Análise Raman de eritrócitos humanos expostos ao acetato de fenilmercúrio em plataforma opto-acustofluídica
espectroscopia Raman; acustofluídica; eritrócitos; fenilmercúrio; biossensoriamento.
Neste trabalho, investigamos bioeventos celulares em eritrócitos humanos expostos ao acetato de fenilmercúrio (PM), um composto organomercurial amplamente utilizado no passado como fungicida, conservante e pesticida, conhecido por apresentar potencial toxicidade biológica. Para isso, foi empregada uma plataforma opto-acustofluídica capaz de realizar o aprisionamento e a manipulação de células por meio de ondas acústicas estacionárias, permitindo a aquisição de espectros Raman de forma não invasiva e sem o uso de substratos para fixação celular. Os espectros Raman foram obtidos utilizando excitação laser de 532 nm em eritrócitos saudáveis e em eritrócitos expostos ao PM. Dois protocolos experimentais distintos foram avaliados: no primeiro, a incubação das células com o composto foi realizada externamente ao dispositivo acustofluídico; no segundo, a exposição ocorreu diretamente no interior da microcavidade do dispositivo. Os resultados indicaram alterações estruturais nos eritrócitos associadas à presença do composto, evidenciadas por modificações nas bandas espectrais relacionadas à hemoglobina e pela redução da capacidade de captação de oxigênio das células. Para a análise dos dados espectroscópicos, foram aplicadas técnicas de análise multivariada, incluindo Análise de Componentes Principais (PCA) e Análise Discriminante Linear (LDA), que permitiram diferenciar de forma eficiente os grupos controle e contaminados. O protocolo de incubação externa apresentou maior separação estatística entre os grupos, indicando maior sensibilidade na detecção das alterações induzidas pelo fenilmercúrio. Os resultados demonstram o potencial da plataforma opto-acustofluídica combinada com espectroscopia Raman como uma ferramenta de biossensoriamento capaz de monitorar alterações bioquímicas em células vivas de maneira rápida, não invasiva e livre de marcadores. Essa abordagem apresenta aplicações promissoras em estudos de toxicologia celular, diagnóstico biomédico e monitoramento de efeitos de contaminantes ambientais em sistemas biológicos.