Banca de QUALIFICAÇÃO: ELANE CONCEICAO DOS SANTOS
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : ELANE CONCEICAO DOS SANTOS
DATA : 21/03/2025
HORA: 09:00
LOCAL: Online (Google Meet) Link: https://meet.google.com/tnb-knrn-gzx
TÍTULO:
ATIVIDADE IMUNOMODULADORA DE CONSTITUINTES DA PRÓPOLIS VERMELHA BRASILEIRA EM MACRÓFAGOS IN VITRO
PALAVRAS-CHAVES:
macrófagos, própolis vermelha brasileira, inflamação.
PÁGINAS: 77
RESUMO:
Os macrófagos são células efetoras do sistema imune inato envolvidas no processo inflamatório, na resposta imune contra patógenos, na regeneração tecidual e manutenção da homeostase. A própolis vermelha brasileira (PVB) possui diversas atividades biológicas, como, antimicrobiana, antitumoral e anti-inflamatória. No entanto, pouco se conhece dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos na atividade imunomoduladora da PVB em macrófagos. Neste contexto, o objetivo deste projeto foi avaliar a atividade imunomoduladora/anti-inflamatória de constituintes da PVB em macrófagos in vitro investigando os mecanismos celulares e moleculares envolvidos. Inicialmente, foi realizada uma triagem de citotoxicidade de seis constituintes (biocanina A, ácido 2-cumárico, hidrato de catequina, ácido p-cumárico, pinocembrina e crisina) em duas concentrações (25 e 50 µM) em macrófagos murinos da linhagem J774A.1. Nenhum dos compostos foram citotóxicos nas concentrações testadas. Para avaliação da atividade imunomoduladora, as células foram estimuladas com LPS e tratadas com os compostos por 48h, seguido da análise da expressão de F4/80 e CD86 por citometria de fluxo. Neste ensaio, apenas o composto crisina (CHRY) reduziu significativamente a porcentagem e a MFI dos dois marcadores, sendo selecionado para experimentos subsequentes, onde o composto CHRY foi capaz de reduzir os níveis de IL-6 no sobrenadante. A fosforilação de MAPKs (ERK1/2, p38 e JNK) foi avaliada por citometria de fluxo intracelular. O tratamento com a CHRY reduziu a fosforilação de ERK1/2 e aumentou a fosforilação de JNK. Posteriormente, células humanas da linhagem THP-1 foram diferenciadas para macrófagos por meio do estímulo com PMA. Inicialmente, o ensaio de citotoxicidade dos compostos CHRY e ISL (isoliquiritigenina, selecionada em um estudo prévio como promissora) foi realizado verificando-se que a concentração de 50 µM não foi citotóxica. A atividade imunomoduladora da CHRY e ISL foi então avaliada em macrófagos THP1 estimulados com LPS/IFN-γ (perfil pró-inflamatório M1). A expressão de HLA-DR e CD86 na superfície celular e a quantificação de citocinas no sobrenadante de cultura foi avaliada. Além disso, a fosforilação de NF-kB foi avaliada por citometria de fluxo. Na população total de células, o tratamento com CHRY aumentou a expressão de CD86 em 12h e reduziu a expressão de HLA-DR em 24h, enquanto o tratamento com ISL não alterou a expressão desses marcadores. Na população de células de maior tamanho relativo (FSChi), o tratamento com a CHRY aumentou a expressão de CD86 e reduziu a expressão de HLA-DR, enquanto ISL reduziu a expressão de ambos os marcadores. Ambos os compostos reduziram os níveis de IL-6 no sobrenadante após 12h e 24h de tratamento. Esses resultados contribuem para elucidação da atividade imunomoduladora dos compostos CHRY e ISL em macrófagos, abrindo caminho para o desenvolvimento de novas intervenções imunológicas para o tratamento de doenças inflamatórias.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1612086 - ENIO JOSE BASSI
Interno(a) - 2269479 - CAROLINNE DE SALES MARQUES
Interno(a) - 2089586 - FRANCIS SOARES GOMES
Externo(a) ao Programa - 1556562 - ABELARDO SILVA JUNIOR - UFALExterno(a) à Instituição - TÁRCIO TEODORO BRAGA - UFPR