Produção, isolamento e caracterização de lacase-simile e caseinase de Amphobotrys ricini obtidas por
fermentação em estado sólido.
Amphobotrys ricini; Lacase; Serina-protease; Caseinase; Isolamento; Caracterização. Colagenase.
A espécie Amphobotrys ricini é um fungo filamentoso ascomiceto que é bastante disseminado em diferentes regiões
do Brasil. É um fungo que possui crescimento saprofítico e fitopatogênico, sendo muito importante economicamente
pela capacidade destrutiva ao produzir o mofo cinzento nos cultivares de mamoneira. Embora bastante estudado nas
relações que possui com seu hospedeiro preferencial e sabendo-se da presença de atividades de lipases, proteases,
pectinases, celulases, maltases, superóxido dismultases e esterases, apenas uma enzima endoglucanase foi
estudada de forma mais detalhada, sendo isolada e caracterizada. Para conhecer quais atividades o fungo
apresenta, o A. ricini foi induzido em placa de petri na produção de enzimas lignolíticas e o inóculo foi aplicado sobre
resíduos de cana, trigo, coco e madeira. Apresentou crescimento mais acentuado sobre resíduo de cana, onde
produziu de forma relevante enzimas com atividade lacase-símile, enzima que foi parcialmente isolada através de
rota composta por extração ácida com quelante, fracionamento salino, diálise e cromatrografia por troca iónica. Uma
outra rota se destaca como rota de pré-purificação a partir de uma extração em pH básico e subsequente aplicação
em sistema trifásico, apresentando maior recuperação que a primeira rota, tornando-se promissora como rota
alternativa de isolamento. O A. ricini também apresentou crescimento relevante sobre resíduo de trigo, apresentando
grande atividade caseinolítica e de formação de coágulo de caseína em leite bovino reconstiuído. A extração dessa
atividade enzimática foi executada com quelante em meio ácido e em meio básico sem quelantes, onde esta última
se destaca como condição mais favorável, apresentando uma rota de pré-purificação promissora que consiste sem
submeter a extração a um sistema aquoso bifásico com maiores recuperações que os sistemas trifásicos e o
fracionamento salino. Não foram detectadas atividades de outras ligninases. A atividade caseinolítica foi inibida
completamente por PMSF, indicando que a enzima responsável é uma serina protease. No extrato com atividade
proteolítica foram detectadas baixas taxas de atividade de tripsina, quimotripsina e elastase-2. As enzimas
parcialmente purificadas possuem atividade caseinolítica e colagenolítica, atividades que podem ser utilizadas na
fabricação de laticínios e na produção de medicamentos cicatrizantes, respectivamente. A lacase-símile parcialmente
isolada ainda é uma enzima com potencial de aplicação em vários campos, exceto na descoloração de corantes em
estado líquido ou na esterilização de utensílios médicos.