IDENTIFICAÇÃO, PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE UMA LECTINA DE FOLHAS DE Jatropha multifida L. (MALPIGHIALES: EUPHORBIACEAE)
Jatropha multifida conhecida pelos nomes vulgares de merthiolate, flor-de-coral, coral, coral-dos-jardins, florde-sangue. É cultivada na América do Sul, no sul da China e na África, sendo também encontrada em Alagoas. Diversas partes da parte são utilizadas na medicina popular como cicatrizante, para o tratamento da candidíase oral, gonorreia, febre, artrite, feridas e infecções. Lectinas são proteínas capazes de se ligar a carboidratos e exercerem diversas atividades biológicas tais como antimicrobiana, inseticida, antitumoral e imunomoduladora. O presente estudo teve como objetivo a identificação, o isolamento e a caracterização de uma lectina extraída das folhas secas de J. multifida. Proteínas foram extraídas do pó das folhas através de homogeneização (16 h, 4ºC) em três diferentes soluções: NaCl 0,15 M, Tris HCl 50 mM pH 8,0 e tampão fosfato de sódio 50 mM pH 7,2. A extração realizada com Tris HCl 50 mM pH 8,0 apresentou maior atividade hemaglutinante (AH: 512) bem como o maior teor de proteínas (AHE: 162,44). A confirmação da presença de lectina foi feita por meio do ensaio de inibição da AH por carboidratos e glicoproteínas, que mostrou maior especificidade a glicose. O extrato obtido foi tratado com sulfato de amônio em diferentes concentrações (0-20%, 20-40%, 40-60% e 60-80%) para fracionamento protéico e a fração 0-20% foi a única que apresentou AH (2048). A fração 0-20% foi submetida à cromatografia em coluna de quitina equilibrada com NaCl 0,15 M. Frações de 2 mL foram coletadas e avaliadas quanto a absorbância a 280 nm e AH. O pico protéico ativo obtido com o eluente ácido acético 0,5 M foi reunido e dialisado contra água Milli-Q e Tris HCl 50 mM pH 8,0 por 6 h. Para verificar o grau de pureza da lectina, a amostra foi analisada por método eletroforético em gel de poliacrilamida a 10% sob condições desnaturantes, utilizando dodecilsulfato de sódio, e na presença e ausência de agente redutor, onde foi possível a visualização de uma banda protéica em condição não-redutora. Em conclusão, as folhas de J. multifida são fonte de lectina.
Merthiolate, hemaglutinação, proteína.