Banca de DEFESA: THAMILLA MARIA SILVA MACIEL

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : THAMILLA MARIA SILVA MACIEL
DATA : 27/02/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

MAPEAMENTO DE INTERAÇÕES ENTRE COMPOSTOS BIOLOGICAMENTE ATIVOS COM UREASE: DESENVOLVIMENTO DE INIBODORES DE UREASE COM POTENCIAL APLICAÇÃO CLÍNICA E AGRÍCOLA.

PALAVRAS-CHAVES:

urease; inibidores; derivados de julolidinas e aminoácidos; enantiosseletividade; estudos biofísicos; técnicas espectroscópicas.

PÁGINAS: 162
RESUMO:

A inibição da atividade da urease pode ser explorada em diversas áreas, e principalmente no contexto clínico e agrícola. Assim, tem-se buscado desenvolver inibidores eficazes para este fim. Dessa forma, esse trabalho propõe avaliar a atividade dos derivados de julolidinas e de aminoácidos (com núcleo da tioureia), como inibidores da urease in vitro. Estudos de inibição enzimática indicaram que o derivado RS12-J2 da classe das julolidinas atuou como inibidor competitivo, enquanto os outros derivados como inibidores mistos. Por fluorescência molecular foi verificado que os valores de Kb (constante de ligação) obtidos indicam força de ligação de intermediária a forte, sendo os derivados RS12 (J1 e J2) os que apresentaram maiores valores de Kb (0,10 - 7,33×106 M-1). O mecanismo de quenching deste processo foi preferencialmente estático. As interações hidrofóbicas foram as forças predominantes na estabilização do complexo enzima-ligante para os derivados de RS11 (ΔH > 0 e ΔS > 0), e forças de van der Waals e ligações de hidrogênio (ΔH < 0 e ΔS < 0) para os derivados de RS12. Empregando o derivado RS12-J2 como modelo verificou-se nos estudos de fluorescência 3D, UV-vis e fluorescência sincronizada que no processo de interação levou a alteração na estrutura nativa da enzima e a microrregião próxima ao resíduo de Tir (sítio ativo) foi mais afetada, corroborando com o estudo de interação com cátions de Ni(II) por espectroscopia de absorção molecular (formação de complexo). Por estudos de competição comprovou-se que o derivado RS12-J2 atua no sítio ativo da enzima. O estudo de transferência de energia ressonante (FRET), indicou que houve transferência de energia não-radiativa. A avaliação do potencial inibitório dos compostos RS12-J1 e RS12-J2 nas ureases do solo demonstrou que o derivado RS12-J2 apresentou eficiência equiparada ao NBPT (inibidor comercial) para os solos S1 e S4, os quais apresentam elevado teor de matéria orgânica. Por fim, nos estudos empregando docking molecular observou-se que a orientação do anel diidrofurano desempenha um papel essencial na coordenação envolvendo o par de elétrons livres do átomo de oxigênio do anel de diidrofurano e os íons Ni(II). Para os derivados de aminoácidos inicialmente foram determinados os valores da concentração inibitória (IC50) para avaliar o potencial destes compostos em inibir a atividade da urease de Jack bean (modelo), sendo obtidos valores entre 0,37 - 0,74 µM, contudo, não foi verificada influência da enantiosseletividade, e da matéria orgânica uma vez que os valores não diferiram estatisticamente a um nível de confiança de 95%, esta tendência também foi obtida nos estudos de interação para os valores de Kb. Os parâmetros termodinâmicos indicaram processo espontâneo. As possíveis interações intermoleculares envolvidas no processo de interação entre urease e os derivados 110-L, 110-D, 110 acL, 110 ac-D e 116 foram as forças de van der Waals e ligações de hidrogênio e parara os derivados 106 ac-L e 106 ac-D foram as interações hidrofóbicas. Ademais, observou-se a ocorrência de quenching estático, e que não houve influência da força iônica no processo de interação a um nível de confiança de 95%, com exceção do composto 110-L. Os estudos por fluorescência 3D e UVvis indicaram mudanças na estrutura secundária da após o processo de interação, no qual houve transferência de energia nãoradiativa. O estudo por fluorescência sincronizada indicou que os derivados 110 ac-L, 110 ac-D e 116 ligam-se à microrregião próxima ao resíduo de Tir. Já os derivados 110-L e 110-D interagem próximo aos resíduos de Trp. O estudo de competição indicou que os derivados de aminoácidos competiram pelo sítio ativo, na presença dos inibidores clássicos, corroborando com o estudo de interação com cátions de Ni(II) por espectroscopia de absorção molecular. Nos ensaios empregando amostras de solo, foi observado que para todos os solos, os derivados foram mais potentes quando comparado ao NBPT. Dessa forma, derivados de julolidinas e derivados de aminoácidos apresentaram inibição da atividade da urease in vitro, e em amostras de solo, sendo possíveis inibidores potentes de urease.

MEMBROS DA BANCA:
Externo(a) à Instituição - CLEITON MOREIRA DA SILVA - UFMG
Externo(a) à Instituição - FRANCISCO ANTÔNIO DA SILVA CUNHA - UFAL
Interno(a) - 1811274 - HUGO JUAREZ VIEIRA PEREIRA
Interno(a) - 1006306 - JADRIANE DE ALMEIDA XAVIER
Presidente - 1613338 - JOSUE CARINHANHA CALDAS SANTOS