Banca de DEFESA: RICARDO ALEXANDRE DOS SANTOS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : RICARDO ALEXANDRE DOS SANTOS
DATA : 30/07/2021
HORA: 13:30
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Nitroso-Bodipy como sonda fluorescente seletiva para determinação de glutationa

 

PALAVRAS-CHAVES:

Biotióis. BODIPY. Sonda. Espectrofluorescência. Plasma sanguíneo.


PÁGINAS: 74
RESUMO:

Processos metabólicos geram o chamado estresse oxidativo, causando uma disrupção da sinalização e do controle redox, podendo vir a acarretar danos moleculares. Entre os antioxidantes mais importantes encontram-se os biotióis, principalmente a glutationa, que junto com suas enzimas antioxidantes, auxiliam na regulação do sistema redox. Neste trabalho é descrito o desenvolvimento de uma metodologia analítica simples e eficiente baseada na espectrofluorescência de BODIPYs modificados estruturalmente na quantificação de glutationa na sua forma reduzida (GSH) em amostras biológicas, a fim de estimar sua condição redox. O método consiste na medição da intensidade de fluorescência emitida pelo adulto sonda-GSH, formado em meio reacional, proporcional a concentração de GSH no sistema. As condições experimentais foram otimizadas: valor de pH = 7,5 em tampão Britton Robinson 10 mM, concentração da sonda BODIPY modificada por nitrosilação a 3-nitrosil-8-(2,6-diclorofenil)-BODIPY (QHM - 300) em 5 µM, ajuste da força iônica, empregando NaCl na concentração de 100 mM. Com o estudo cinético, averiguou-se um tempo mínimo de 15 min de reação no sistema, para que houvesse a completa formação do adulto fluorescente, já o estudo da estabilidade demonstrou a fotoestabilidade da sonda sem alteração da intensidade de fluorescência num período de 60 min. Os parâmetros analíticos foram determinados: faixa linear de 0-5 µM, limite de detecção (LOD) de 61,4 nM e desvios padrões relativos (RSD) de 3,9% e 4,4% para as concentrações de 1 µM e 5 µM, respectivamente. Na quantificação de GSH, a proteína albumina, a cisteína e os ácidos graxos foram os interferentes do método, alterando o sinal de fluorescência do sistema, comparado ao branco contendo apenas a GSH, simulando as condições de aplicação em plasma sanguíneo.


MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - Flávio da Silva Emery - USP
Presidente - 1006306 - JADRIANE DE ALMEIDA XAVIER
Interno - 1613338 - JOSUE CARINHANHA CALDAS SANTOS
Interna - 2120103 - MARILIA OLIVEIRA FONSECA GOULART
Interno - 1697766 - WANDER GUSTAVO BOTERO
Notícia cadastrada em: 21/07/2021 11:50
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