Banca de DEFESA: ALEXSANDRA NASCIMENTO FERREIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ALEXSANDRA NASCIMENTO FERREIRA
DATA : 26/08/2022
HORA: 14:00
LOCAL: Sala de aula do PPGQB
TÍTULO:

Produção de lipase e protease fúngica em meio de baixo custo: purificação, caracterização e aplicação biotecnológica

PALAVRAS-CHAVES:

Moesziomyces aphidis; Pycnoporus sanguineus; bioprocessos; resíduos agroindustriais; coagulação de leite

PÁGINAS: 100
RESUMO:

Enzimas microbianas são preferidas para aplicações industriais e biotecnológicas por possuírem características e
capacidade funcional em condições extremas, essenciais para essas aplicações. Essas enzimas são utilizadas na
indústria de alimentos, farmacêutica, cosmético, biodiesel, têxtil, detergente etc. Enzimas microbianas podem ser produzidas em bioprocessos líquidos ou sólidos, onde podem ser utilizados resíduos como fonte de nutrientes e indutores, resíduos agroindustriais e óleos residuais, por exemplo. Os resíduos agroindustriais são em especial
aproveitados nos bioprocessos sólidos, além de reduzir o custo de produção da enzima colabora com a redução dos impactos ambientais causados pelo descarte inadequado. Visto que, enzimas são onerosas e a redução do seu custo de produção torna-se necessário. Diante disso, nesse trabalho objetivamos produzir enzimas fúngicas, lipases e proteases, em meios de baixo custo, purificá-las e aplicá-las. Para isso, em uma triagem com diferentes cepas de leveduras em bioprocesso líquido, a levedura Moesziomyces aphidis foi selecionada como melhor produtora de lipase em meio contendo apenas óleo de fritura residual e extrato de levedura por 48h. Foram testadas diferentes técnicas de purificação para anteceder a cromatografia, a saber precipitação com sulfato de amônio, etanol, acetona, sistema aquoso trifásico e ultrafiltração. A ultrafiltração foi escolhida e a lipase de M. aphidis foi purificada com apenas duas etapas, ultrafiltração e cromatografia de exclusão molecular (Sephacryl S-100), com 50% de recuperação final. Além disso, o fungo filamento Pycnoporus sanguineus foi selecionado como bom produtor de lipases e proteases em bioprocesso sólido utilizando farelo de trigo. As enzimas foram parcialmente purificadas em fracionamento com sulfato de amônio, separadas em diferentes frações, podem ser aplicadas em cromatografia e isoladas separadamente. O sólido resultante, após ser liofilizado apresentou atividade lipolítica e foi aplicado em reações de resolução cinética de racematos. A atividade proteolítica do extrato enzimático bruto (EEB) foi verificada frente a hidrólise dos substratos azocaseína e caseína. O EEB ainda apresentou atividade de quimotripsina e elastase. O efeito dos diferentes inibidores de protease na atividade enzimática sugere que a protease de P. sanguineus é uma serina protease semelhante à quimotripsina. A protease de P. sanguineus coagulou o leite em pó desnatado e leite líquido integral, sem e com adição
de cálcio. A melhor condição para coagulação foi 120 min e 50 °C. A coagulação aumentou com o aumento do tempo, da temperatura, da concentração de cálcio e de enzima. Essa foi a primeira protease coagulante de P. sanguineus e primeira serina protease tipo quimotripsina coagulante de fungo filamentoso, a qual mostrou potencial para ser aplicada na indústria alimentícia na coagulação de leite e fabricação de queijos. O sólido fermentado com atividade lipolítica também tem potencial para ser aplicado na indústria farmacêutica. Aqui também apresentamos a primeira lipase de M. aphidis a ser purificada. Enzimas com alto valor biotecnológico e produzias em meios residuais de baixo custo

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - MARCELO FRANCO - UESC-BA
Interno - 2089586 - FRANCIS SOARES GOMES
Presidente - 1811274 - HUGO JUAREZ VIEIRA PEREIRA
Externo ao Programa - 036.711.126-89 - JOSE MARIA RODRIGUES DA LUZ - UFAL
Externo ao Programa - 1653558 - LUCIANO APARECIDO MEIRELES GRILLO
Interna - 1294906 - RUTH RUFINO DO NASCIMENTO