CARACTERIZAÇÃO DE UMA PLATAFORMA FENOTÍPICA BASEADA EM DROSOPHILA MELANOGASTER PARA TRIAGEM DE CANDIDATOS TERAPÊUTICOS PARA A DOENÇA DE ALZHEIMER
Doença de Alzheimer; Drosophila melanogaster; Triagem de fármacos; Neurodegeneração.
A doença de Alzheimer (DA) é a principal causa de demência no mundo e caracteriza-se pelo acúmulo de peptídeos β-amiloide, hiperfosforilação da proteína tau, neuroinflamação, disfunção mitocondrial e alterações metabólicas progressivas. Apesar dos avanços na compreensão de sua fisiopatologia, as opções terapêuticas atualmente disponíveis apresentam eficácia limitada, reforçando a necessidade do desenvolvimento de plataformas experimentais capazes de acelerar a identificação de novos candidatos terapêuticos. Nesse contexto, Drosophila melanogaster destaca-se como um organismo modelo devido à elevada conservação de vias biológicas relacionadas à neurodegeneração, facilidade de manipulação genética, baixo custo e curto ciclo de vida. O presente estudo teve como objetivo caracterizar uma plataforma experimental baseada em D. melanogaster para a triagem de compostos com potencial terapêutico na doença de Alzheimer. Para isso, foi utilizado o sistema binário UAS/GAL4 para induzir a expressão tecido-específica da proteína humana APP.Aβ42.E693G (Arctic) no sistema nervoso central (elav-GAL4) e no disco imaginal ocular (gmr-GAL4). A caracterização do modelo compreendeu análises morfológicas do olho composto por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e pela metodologia Low Angle Ring Illumination Stereomicroscopy (LARIS), incluindo avaliação qualitativa, escore semiquantitativo de neurodegeneração e mensuração da área ocular. Adicionalmente, foram realizados ensaios de motilidade larval, sobrevivência e caracterização metabolômica por espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio (1H RMN). Como etapa de validação farmacológica da plataforma, foi proposta a avaliação da biocompatibilidade e do potencial neuroprotetor do cloridrato de donepezila, principal inibidor da acetilcolinesterase utilizado no tratamento clínico da doença. A integração de desfechos morfológicos, comportamentais e metabolômicos permitirá uma caracterização abrangente do fenótipo neurodegenerativo e fornecerá uma plataforma robusta, reprodutível e de baixo custo para a triagem pré-clínica de compostos com potencial terapêutico para a doença de Alzheimer.