Banca de DEFESA: JOYCE CAMILA BARBOSA DA SILVA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JOYCE CAMILA BARBOSA DA SILVA
DATA : 04/10/2023
HORA: 16:00
LOCAL: Sala Virtual do Google Meet (https://meet.google.com/xhr-rmgo-kwr)
TÍTULO:

IDENTIFICAÇÃO DE FUNGOS FILAMENTOSOS CONTAMINANTES EM SISTEMA ABERTO DE TRATAMENTO DE SORO DO LEITE POR MICROALGAS

PALAVRAS-CHAVES:

identificação molecular, PCR, biorremediação, microalga-fungo, simbiose

PÁGINAS: 61
RESUMO:

O descarte inadequado de efluentes provindos das unidades fabris de indústrias de laticínios podem degradar o meio ambiente devido ao alto teor de poluentes presentes no soro do leite. Dessa forma, é necessário o tratamento prévio desse efluente antes do lançamento em corpos d’água, porém, os tratamentos físico-químicos geralmente aplicados para esse tipo de efluente são altamente onerosos tornando-se inviável para as indústrias de pequeno e médio porte. Nesse contexto, os processos biológicos ganham destaque devido à simplicidade de sua aplicação e viabilidade econômica. Em comparação com as estratégias tradicionais de tratamento biológico, o uso de microalgas tem vantagens como maior capacidade de consumo de nutrientes, principalmente nitrogênio e fósforo, e são geralmente cultivadas em sistema aberto, o qual tem alto risco de contaminação por outros grupos microbiológicos. À vista disso, a relação simbiótica entre algas e fungos ganham destaque pois essa associação facilita a colheita de algas copeletizando-as em pellets de fungos e pode aumentar a eficiência do tratamento. Portanto, o presente trabalho tem como objetivo caracterizar fungos filamentosos isolados durante o processo de tratamento terciário de soro do leite por microalgas da espécie Tetradesmus obliquus LCE-01 em sistema aberto. O sistema de tratamento por Tetradesmus obliquus LCE-01 era composto por reatores abertos utilizando efluente residual com cargas orgânicas (demanda química de oxigênio) entre 1000-4000 mg L^-1, agitados magneticamente, durante 15 dias de processo, mantidos a 30-35ºC e pH 7,5-8,0 com iluminação lateral de 100 µmol m^-2 s^-1. As amostras do reator foram coletadas após crescimento vigoroso microbiano no reator (log UFC/mL entre 9-10) e inoculadas por espalhamento em placas de Petri com meio BDA (batata dextrose agar) em diluições 10^-2, 10^-4 e 10^-6, de forma a favorecer o crescimento de colônias isoladas. As colônias isoladas foram transferidas utilizando alça de níquel e cromo para placas de Petri contendo BDA onde puderam se desenvolver sozinhas. Para a caracterização macroscópica, pedações das colônias foram homogeneizadas em água peptonada 0,1% e reinoculadas em placas de Petri para se observar o desenvolvimento das colônias a partir de seus esporos, caracterizando seus micélios. Para a microscopia, preparou-se lâminas com pedaços do micélio fúngico e corados com azul de lactofenol (azul de algodão) a fim de visualizar as hifas fúngicas e estruturas reprodutivas. A caracterização molecular (genética) foi realizada seguindo as seguintes etapas de extração do DNA, amplificação e sequenciamento do DNA utilizando os primers ITS (internal transcript spacer) (1 e 4) e beta-tubulina (β-tub ou BT) (2a, 2b, T1 e T2), edição de dados e análise filogenética utilizando o Software CodonCode Aligner ®, o banco de dados do GenBank e o programa MEGA X. Conseguiu-se isolar 9 cepas fúngicas, que após algumas gerações de repiques só mantiveram viabilidade para cultivo em laboratório 5 (F2, F4, F5, F6 e F10), as quais foram utilizadas para as etapas de caracterização. Em relação as características macroscópicas das colônias e microscópicas do micélio/hifas, percebeu-se que o fungo F2 possuíram colônias esporuladas de cor verde-oliva, superfície algodonosa, margens brancas e circulares e cor reversa preta com centro enrugado. Foram visualizadas hifas finas, septadas e ramificadas e conídios em formato elipsoide e irregulares, possivelmente caracterizando um gênero Cladosporium. O fungo F4 possuiu colônias brancas que amarelam com o tempo com superfície granular, borda branca e circular com cor reversa. O fungo possuiu hifas hialinas, finas, não-septadas e espiraladas. O gênero de F4 possuiu as características de um Epidermophyton.         O fungo F5 apresentou colônias brancas e após esporulação tom rósea, superfície algodonosa com borda branca irregular e cor reversa branca-amarelada. O fungo possuiu hifas espiraladas, hialinas e finas com microconídios ovalares/redondos, o que caracterizou um fungo do gênero Trichophyton. O fungo F6 apresentou micélio de cor branco, superfície algodonosa, borda branca e circular e coloração reversa amarela; com hifas não-septadas, ramificadas e hialinas com conídios globosos e intercalares, sendo ligados provavelmente a um gênero Chrysosporium. Por fim, o fungo F10 demonstrou colônias marrons no centro, verde na parte interna e de bordas brancas superfície granular e coloração reversa da colônia preta, com hifas septadas e hialinas, ramificadas próximas ao ápice com grupo de filíades com conídios e conidiósporo característicos do gênero Penicillium. Os 5 fungos, se confirmados os gêneros, são do filo dos ascomicetos. Em relação a caracterização molecular para a confirmação do gênero, e consequentemente da espécie, conseguiu-se a extração dos DNAs fúngicos e a amplificação utilizando os primers ITS e BT. No entanto, enviou-se o material genético para sequenciamento, o que possibilitaria a construção da árvore filogenética dos fungos, e os resultados não foram recebidos até o momento da defesa da dissertação, mas estarão na versão final do manuscrito. O isolamento e a caraterização de fungos que naturalmente realizam simbiose com as microalgas abrem espaço, principalmente, no tratamento de efluentes, mas também em outras áreas biotecnológicas que possam se exercer da utilização de sua biomassa como biocombustíveis e biofertilizantes.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3081569 - CARLOS EDUARDO DE FARIAS SILVA
Interno(a) - 1644323 - KARINA RIBEIRO SALOMON
Externo(a) ao Programa - 1296115 - ALBANISE ENIDE DA SILVA - UFALExterno(a) à Instituição - ANA KARLA DE SOUZA ABUD - UFS