Banca de QUALIFICAÇÃO: RICARDO BEZERRA COSTA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : RICARDO BEZERRA COSTA
DATA : 30/09/2022
HORA: 14:00
LOCAL: por videoconferência
TÍTULO:

PURIFICAÇÃO, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES ANTITUMORAL, ANTIMICROBIANA E SOBRE PARÂMETROS HEMOSTÁTICOS DAS LECTINAS DE Genipa americana L. (JENIPAPO), Rhizophora mangle L. (MANGUE VERMELHO) E DA PRÓPOLIS VERMELHA DE ALAGOAS

PALAVRAS-CHAVES:

câncer; anticoagulante; antifúngico; proteína; cromatografia

PÁGINAS: 190
RESUMO:

O uso de produtos derivados de plantas apresenta grande potencial econômico e farmacológicos e isso se dá em decorrência da presença dos compostos bioativos. Dentre estes, lectinas veem sendo intensamente exploradas devido as diversas ações biotecnológicas que podem ter, destacando-se as atividades antifúngica, anticoagulante e antitumoral. Desse modo, o presente trabalho teve por objetivo purificar, caracterizar e avaliar a atividade antitumoral, antimicrobiana e sobre parâmetros hemostáticos das lectinas de Genipa americana L. (jenipapo), Rhizophora mangle L. (mangue vermelho) e da própolis vermelha de Alagoas. As lectinas foram isoladas inicialmente através de extração em Tris-Hcl 50mM pH 8.0, para sementes e cascas de G. americana), NaCl 0,15M, para sementes de R. mangle, e NaCl 0,15M com com 30 % de etanol para a própolis vermelha. Em seguida, foram feitos fracionamentos salinos com sulfato de amônio e as frações que apresentaram melhor atividade foram submetidas à cromatografia de exclusão molecular (Sephacryl S-100), para isolamento das lectinas de casca de G. americana (GaBL); cromatografia de exclusão molecular (Sephacryl S-100) seguida de uma trocadora catiônica (DEAE Sepharose) para a lectina de sementes de G. americana (GaSL); ou cromatografia em coluna de quitina para isolar as lectinas de R. mangle e da própolis vermelha. Através de um único passo cromatográfico foi isolada uma lectina (GaBL) e por meio de SDS-PAGE (10%) foi observado que GaBL apresenta uma massa molecular aproximada de 242,5 kDa. No teste citotóxico GaBL não se mostrou tóxica para linhagens celulares de fibroblastos 3T3 em concentrações abaixo de 50μg/mL. A atividade antitumoral avaliada utilizou as linhagens celulares de câncer de pele humano (A431), melanoma (B16) e carcinoma de células escamosas da língua (SCC9). A proliferação celular e a migração celular foram diminuidas em todas as linhagens avaliadas em contato com 10 μg/ml of GaBL diminuiu a invasão de células SCC9. A apoptose foi maior nas células B16 e SCC9 tratadas com lectina. A regulação positiva de GaBL de E-caderina e supressão de Col1A1 em todas as cepas testadas indicou um menor desenvolvimento de câncer. A lectina de sementes de G. americana, GaSL, teve sua atividade hemaglutinante (AH) inibida fortemente por ramnose, mas não foi afetada por íons divalentes nem por EDTA. GaSL é classificada como uma lectina termoestável, com uma melhor atividade a uma temperatura abaixo de 80 ° C e na faixa de pH 5,0 a 6,0. A lectina de sementes de R. mangle é também termoestável, mas, diferente das demais, foi inibida mais intensamente por arabinose e caseína, teve melhor atividade em pH 8,0 e 9,0 e teve sua AH reduzida em presença de íons Mn2+, Mg2+ e Ca2+, não alterada por EDTA e estimulada em presença de Zn2+. A lectina da própolis também foi inibida fortemente por caseína, é termoestável, apresentou melhor AH na faixa de pH 5,0 a 6,0 e foi reduzida em presença de Mn2+, Mg2+, levemente estimulada por Zn2+ e não afetada por EDTA e Ca2+. Com isso podemos destacar que GaBL tem elevado potencial antitumoral contra câncer de cabeça. As demais lectinas apresentam características estruturais que favorecem o estudo biotecnológico envolvendo a saúde humana.

MEMBROS DA BANCA:
Externa ao Programa - 1120583 - EDMA CARVALHO DE MIRANDA
Presidente - 2089586 - FRANCIS SOARES GOMES
Interno - 3061390 - LEONARDO BROETTO
Interno - 1653558 - LUCIANO APARECIDO MEIRELES GRILLO
Externa ao Programa - 166.228.474-87 - SONIA SALGUEIRO MACHADO - UFAL