DIVERSIDADE GENÉTICA DA PEREREQUINHA-DE-BROMÉLIA Phyllodytes gyrinaethes PEIXOTO, CARAMASCHI E FREIRE, 2003 NA MATA ATLÂNTICA SETENTRIONAL
Anfíbio, Centro de Endemismo Pernambuco, genes mitocondriais, espécie ameaçada, conservação
Phyllodytes gyrinaethes é uma espécie de anuro bromelígena endêmica do norte da Mata Atlântica e ameaçada de extinção. A distribuição restrita somada ao modo de vida associado a bromélias torna essa espécie ainda mais vulnerável, evidenciando a importância de caracterizar a sua variabilidade genética para subsidiar ações de conservação. Este estudo teve como objetivo geral analisar a diversidade genética de Phyllodytes gyrinaethes nas localidades conhecidas de sua ocorrência. A hipótese testada é de que a espécie apresenta baixa diversidade genética e estruturação populacional marcante, com ausência de fluxo gênico entre as áreas de ocorrência. Amostras hepáticas e musculares de 26 indivíduos provenientes de sua localidade-tipo (Estação Ecológica de Murici – ESEC de Murici), localizada em Murici, Alagoas e do Parque Natural Municipal Professor João Vasconcelos Sobrinho (PNMPJVS), localizado em Caruaru, Pernambuco foram utilizadas. O DNA genômico total foi extraído pelo método Fenol/Clorofórmio. Fragmentos dos genes mitocondriais 16S rRNA (16S) e Citocromo B (CYTB) foram amplificados através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). As sequências de DNA foram editadas no software Bioedit. O alinhamento e cálculo da distância genética p foi realizado no software MEGA. As análises descritivas da diversidade genética e as Análises de Variância Molecular (AMOVA) foram feitas nos softwares DNAsp e Arlequin. As redes de haplótipos foram construídas no software PopART. Todas estas análises foram feitas separadamente para cada um dos genes. A história demográfica de P. gyrinaethes da ESEC de Murici foi inferida por meio da reconstrução de um Bayesian Skyline Plot (BSP), utilizando o software BEAST. Foram obtidas 18 sequências do gene 16S com 560 pares de base, sendo 95,18% sítios conservados e 4,82% polimórficos. Três haplótipos foram identificados, com diversidade haplotípica de 0,6797 e nucleotídica de 0,0415. Dois haplótipos foram exclusivos da ESEC de Murici e um do PNMPJVS, sem compartilhamento de haplótipos entre as UCs. A distância genética p foi de 4,89% entre as duas UCs. A AMOVA revelou que 97,63% da variação genética é explicada pelas diferenças entre as populações e apenas 2,37% dentro das populações (FST= 0,97; p= 0,0002). Para o gene CYTB, 21 sequências com 397 pares de base foram obtidas, sendo 87,66% sítios conservados e 12,34% polimórficos. Foram identificados seis haplótipos, quatro exclusivos da ESEC de Murici e dois do PNMPJVS, também sem compartilhamento entre UCs. A distância genética p foi de 11,3% entre as duas UCs. A AMOVA revelou que 85,53% da variação genética é explicada pelas diferenças entre as populações e 14,47% dentro das populações (FST= 0,85; p= 0,0002). A análise BSP dos indivíduos de Phyllodytes gyrinaethes da ESEC Murici revelou que o tamanho populacional presente da espécie parece estar diminuindo. Os resultados obtidos até o momento fornecem informações importantes sobre a diversidade genética de P. gyrinaethes e contribuem para a avaliação do grau de ameaça que a espécie enfrenta.